Typy biochemických testů, co jsou pro a důležité



biochemické testy v mikrobiologii se jedná o soubor chemických testů, které se provádějí na mikroorganismech přítomných ve vzorku za účelem jejich identifikace; Tyto mikroorganismy jsou obvykle bakterie. Mikrobiologovi je k dispozici velké množství biochemických testů.

Volba těchto testů je však založena na předběžných poznatcích, jako je vzor barvení Gram a růstové znaky, které umožňují přiřazení bakterií do určité kategorie. Biochemické testy jsou založeny především na metabolických vlastnostech každého typu bakterií. 

Ne všechny bakterie mají stejné vlastnosti, proto se zkoumá, zda mají nějaký konkrétní enzym přidáním substrátu a čekají, až se reakce objeví. Obvykle je toto stanovení dáno změnou barvy nebo pH v kultivačním médiu.

Pro spolehlivou identifikaci bakterie až do úrovně druhu je často zapotřebí méně než 15 biochemických testů. Provádění více biochemických testů může zvýšit důvěru v identifikaci.

Většina těchto biochemických testů se provádí v séru nebo krevní plazmě. Mohou však být také prováděny mimo jiné v jiných biologických sekrecích, jako je moč, mozkomíšní mok, pleurální tekutina a stolice..

Index

  • 1 Klasifikace
    • 1.1 Univerzální
    • 1.2 Diferenciály
    • 1.3 Specifické
  • 2 Typy biochemických testů
    • 2.1 Test katalázy
    • 2.2 Oxidázový test
    • 2.3 Test solného mannitolového agaru (MSA)
    • 2.4 Koagulázový test
    • 2.5 Test na ureázu
  • 3 Jaké jsou biochemické testy??
  • 4 Význam
  • 5 Odkazy

Klasifikace

Biochemické testy lze rozdělit do 3 skupin:

Univerzální

Jedná se o testy, které mohou být provedeny na jakémkoliv vzorku a které vedou mikrobiologa k následujícím biochemickým testům, které musí být provedeny za účelem získání spolehlivé identifikace..

Příklad

Test katalázy a oxidázy.

Diferenciály

Jedná se o testy, které se provádějí za účelem identifikace mikroorganismů přítomných ve vzorku až po úroveň druhu.

Identifikace se provádí na základě výsledků kombinace testů, protože jednotlivé výsledky nejsou natolik informativní, aby umožnily identifikaci.

Příklad

Testy IMViC a testy využití cukru.

Specifické

Jedná se o specifické testy pro určitý soubor druhů nebo subtyp druhů. Tyto testy se obvykle provádějí pro potvrzení nebo identifikaci na úrovni poddruhů. Jednotlivé testy jsou samy o sobě informativní.

Příklad

Test y-glutamyl aminopeptidázy.

Typy biochemických testů

Test katalázy

Katalázový test je test, který demonstruje přítomnost katalázového enzymu rozkladem peroxidu vodíku na kyslík a vodu. Malé množství bakterií se přidá na kapku peroxidu vodíku (3%) na sklíčku.

Katalázový test je jednoduchý test, který používají mikrobiologové k identifikaci bakteriálních druhů a ke stanovení schopnosti některých mikrobů štěpit peroxid vodíku produkcí katalázového enzymu..

Pokud jsou pozorovány bubliny kyslíku, znamená to, že bakterie má katalázový enzym, protože katalyzuje rozklad peroxidu vodíku na kyslík a vodu. Říká se, že organismus je katalázově pozitivní (například: Staphylococcus aureus).

Test oxidázy

Tento test se používá k identifikaci mikroorganismů, které obsahují enzym cytochrom oxidasu (důležitý v elektronovém transportním řetězci). To je obyčejně používáno rozlišovat mezi rodinami Enterobacteriaceae a Pseudomadaceae.

Cytochrom oxidasa přenáší elektrony z řetězce transportu elektronů na kyslík (finální akceptor elektronů) a snižuje ho na vodu. Testy oxidázy poskytují umělé elektron donorové a akceptorové molekuly.

Když je donor elektronu oxidován působením cytochrom oxidasy, médium se stává tmavě fialovým a je považováno za pozitivní výsledek. Mikroorganismus Pseudomonas aeruginosa je příkladem pozitivní oxidázové bakterie.

Agarový test solného mannitolu (MSA)

Tento typ testu je selektivní i diferenční. MSA vybere organismy schopné žít v prostředích s vysokými koncentracemi soli, jako jsou druhy Staphylococcus na rozdíl od druhu. \ t Streptococcus, jejichž růst je za těchto podmínek inhibován.

Diferenciální složkou v tomto testu je cukr mannitol. Organismy schopné používat mannitol jako zdroj potravy budou produkovat vedlejší produkty fermentace, které jsou kyselé, a proto snižují pH média..

Kyselost média způsobí, že indikátor pH, fenolová červeň, zbarví žlutě. Příklady druhů bakterií, které lze touto metodou diferencovat, jsou: Staphylococcus aureus (pozitivní proto, že ferity mannitol) a Staphylococcus epidermidis (negativní, protože mannitol nefermentuje).

Koagulázový test

Koaguláza je enzym, který pomáhá srážet krevní plazmu. Tento test se provádí na pozitivních bakteriích pozitivních na grampozitivní a katalázu, které se identifikují Staphylococcus aureus (pozitivní koaguláza) Ve skutečnosti je koaguláza faktorem virulence tohoto bakteriálního druhu.

Tvorba sraženin kolem infekce způsobené touto bakterií ji pravděpodobně chrání před fagocytózou. Tento test je velmi užitečný, když chcete rozlišovat mezi Staphylococcus aureus jiných druhů. \ t Staphylococcus které jsou negativní koagulázy.

Test na ureázu

Tento test se používá k identifikaci bakterií schopných hydrolyzovat močovinu za použití enzymu ureázy. Běžně se používá k rozlišení pohlaví Proteus jiných enterických bakterií.

Hydrolýza močoviny produkuje jako jeden ze svých produktů amoniak. Tato slabá báze zvyšuje pH média nad 8,4 a indikátor pH (fenolová červeň) se mění ze žluté na růžovou. Příkladem pozitivní ureasové bakterie je Proteus mirabilis.

Jaké jsou biochemické testy??

Biochemické testy v mikrobiologii se používají k diagnostice nemocí způsobených mikroby a ke sledování léčby podávané v boji proti nim. Dále se používají pro screening infekčních onemocnění a pro jejich prognózu..

Biochemická identifikace mikroorganismů nabízí představu o tom, co tyto mikroorganismy dokážou dělat, přičemž je možné rozlišovat mezi různými kmeny stejných druhů specifickými biochemickými profily..

Rozdíly ve specifických enzymatických činnostech informují o ekologii, fyziologii nebo přirozeném prostředí mikroorganismu, které lze v některých případech považovat za důležité informace..

Význam

Strukturální rozdíly s ohledem na tvar, velikost a dispozici bakterií v procesu identifikace pomáhají jen velmi málo, protože existuje mnoho druhů bakterií, které mají podobný tvar, velikost a dispozice..

Z tohoto důvodu je identifikace bakterií založena především na rozdílech v jejich biochemických aktivitách.

Každý druh bakterií má dobře definovaný soubor metabolických aktivit odlišných od všech ostatních druhů. Tyto biochemické "otisky prstů" jsou vlastnosti řízené bakteriálními enzymy.

Biochemické testy jsou proto důležité, protože pomáhají badateli správně identifikovat patogeny přítomné ve vzorku a tímto způsobem mohou pacientovi doporučit vhodnou léčbu..

Odkazy

  1. Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Klinická biochemie (8. vydání). Wiley-Blackwell.
  2. Clarke, P. H., & Cowan, S. T. (1952). Biochemické metody bakteriologie. Journal of General Microbiology, 6(1952), 187-197.
  3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Klinická biochemie (5. vydání). Elsevier Health Sciences.
  4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Praktická příručka mikrobiologie (2. vydání). CRC Stiskněte.
  5. Harrigan, W. (1998). Laboratorní metody v potravinářské mikrobiologii (3. vydání). Akademická tisková zpráva.
  6. Vasanthakumari, R. (2009). Praktická mikrobiologie. BI Publikace Pvt Ltd.