Nefelometrie v tom, co tvoří a aplikace



nefelometrie spočívá v měření záření způsobeného částicemi (v roztoku nebo v suspenzi), čímž se měří výkon rozptýleného záření v jiném úhlu než ve směru dopadajícího záření.

Když částice v suspenzi je dosažena paprskem světla, je zde část odrazeného světla, další část je absorbována, další část je odkloněna a zbytek je přenášen. Proto když světlo dopadá na průhledné médium, ve kterém je suspenze pevných částic, suspenze je pozorována zakalená.

Index

  • 1 Co je nefelometrie??
    • 1.1 Disperze záření částicemi v roztoku
    • 1.2 Nephelometer
    • 1.3 Odchylky
    • 1.4 Metrologické charakteristiky
  • 2 Aplikace
    • 2.1 Detekce imunitních komplexů
    • 2.2 Další aplikace
  • 3 Odkazy

Co je nefelometrie??

Disperze záření částicemi v roztoku

V okamžiku, kdy paprsek světla zasáhne částice látky v suspenzi, změní směr šíření paprsku svůj směr. Tento efekt závisí na následujících aspektech:

1. Rozměry částic (velikost a tvar).

2. Charakteristiky suspenze (koncentrace) \ t.

3. Vlnová délka a intenzita světla.

4. Vzdálenost dopadajícího světla.

5. Úhel detekce.

6. Index lomu média.

Nephelometr

Nefelometr je přístroj používaný k měření částic suspendovaných v kapalném vzorku nebo v plynu. Takže fotobuňka umístěná pod úhlem 90 ° vzhledem ke světelnému zdroji detekuje záření částicemi přítomnými v suspenzi.

Také světlo odražené částicemi směrem k fotobuňce závisí na hustotě částic. Diagram 1 uvádí základní složky, které tvoří nefelometr:

A. Zdroj záření

V nefelometrii je životně důležité mít zdroj záření s vysokým světelným výkonem. Existují různé typy, od xenonových výbojek a rtuťových výbojek, halogenových žárovek wolframu, laserového záření a dalších.

B. Monochromátorový systém

Tento systém se nachází mezi zdrojem záření a kyvetou, takže tímto způsobem se zabrání výskytu záření na kyvetě s různými vlnovými délkami ve srovnání s požadovaným zářením..

Jinak by fluorescenční reakce nebo zahřívací účinky v roztoku způsobily odchylky od měření.

C. Čtení kyvety

Je to obecně hranolová nebo válcová nádoba a může mít různé velikosti. V tomto je řešení ve studiu.

D. Detektor

Detektor je umístěn ve specifické vzdálenosti (obvykle velmi blízko nádrže) a je zodpovědný za detekci záření rozptýlené částicemi suspenze..

E. Systém čtení

Obecně se jedná o elektronický stroj, který přijímá, převádí a zpracovává data, což jsou v tomto případě měření získaná z provedené studie.

Odchylky

Každé měření podléhá procentu chyb, což je dáno především:

Znečištěné kbelíky: v kyvetách jakýkoliv prostředek, který je mimo studijní roztok, který je uvnitř nebo vně kyvety, redukuje sálavé světlo na cestě k detektoru (vadné kyvety, prach ulpělý na stěnách kyvety).

Interference: přítomnost některých mikrobiálních kontaminantů nebo zákalu rozptýlí sálavou energii, což zvyšuje intenzitu disperze.

Fluorescenční sloučeninyJedná se o sloučeniny, které při excitaci dopadajícím zářením způsobují chybné a vysoké hodnoty hustoty disperze.

Konzervace činidel: nedostatečná teplota systému by mohla způsobit nepříznivé podmínky pro studii a vyvolat přítomnost zakalených činidel nebo sraženin.

Kolísání elektrické energie: Aby nedocházelo k tomu, že dopadající záření je zdrojem chyb, jsou pro rovnoměrné záření doporučeny stabilizátory napětí.

Metrologické charakteristiky

Vzhledem k tomu, že radiační síla detekovaného záření je přímo úměrná hmotnostní koncentraci částic, nefelometrické studie mají v teorii vyšší metrologickou citlivost než jiné podobné metody (např. Turbidimetrie)..

Navíc tato technika vyžaduje zředěné roztoky. To umožňuje minimalizovat absorpční i odrazové jevy.

Aplikace

Nefelometrické studie zaujímají v klinických laboratořích velmi důležité postavení. Aplikace se pohybují od stanovení imunoglobulinů a proteinů akutní fáze, komplementu a koagulace.

Detekce imunitních komplexů

Když biologický vzorek obsahuje požadovaný antigen, je smíchán (v pufrovém roztoku) s protilátkou za vzniku imunitního komplexu.

Nefelometrie měří množství světla, které je rozptýleno reakcí antigen-protilátka (Ag-Ac), a tímto způsobem jsou detekovány imunitní komplexy..

Tato studie může být provedena dvěma způsoby:

Nefelometrie konečného bodu:

Tato technika může být použita pro analýzu koncového bodu, ve kterém je protilátka studovaného biologického vzorku inkubována po dobu 24 hodin..

Komplex Ag-Ac se měří pomocí nefelometru a množství rozptýleného světla se porovnává se stejným měřením provedeným před vytvořením komplexu..

Kinetická nefelometrie

V této metodě se průběžně sleduje rychlost tvorby komplexu. Rychlost reakce závisí na koncentraci antigenu ve vzorku. Zde se měření bere jako funkce času, takže první měření se provede v čase "nula" (t = 0).

Kinetická nefelometrie je nejpoužívanější technikou, protože studie může být provedena za 1 hodinu ve srovnání s dlouhou dobou metody koncového bodu. Poměr disperze se měří těsně po přidání činidla.

Proto, pokud je činidlo konstantní, je množství přítomného antigenu považováno za přímo úměrné rychlosti změny.

Další aplikace

Nefelometrie se obecně používá při analýze chemické kvality vody, pro stanovení jasnosti a kontrolu procesů jejího zpracování.

Používá se také k měření znečištění ovzduší, při kterém se koncentrace částic určuje z disperze, kterou produkují při dopadajícím světle..

Odkazy

  1. Britannica, E. (s.f.). Nefelometrie a turbidimetrie. Získané z britannica.com
  2. Al-Saleh, M. (s.f.). Turbidimetrie a nefelometrie. Zdroj: pdfs.semanticscholar.org
  3. Bangs Laboratories, Inc. (s.f.). Obnoveno z technochemical.com
  4. Morais, I. V. (2006). Turbidimetrická a nefelometrická analýza průtoku. Získáno z repositorio.ucp.p
  5. Sasson, S. (2014). Principy nefelometrie a turbidimetrie. Zdroj: notesonimmunology.files.wordpress.com
  6. Stanley, J. (2002). Základy imunologie a serologie. Albany, NY: Thompson Learning. Citováno z knih.google.co.ve
  7. Wikipedia. (s.f.). Nefelometrie (lékařství). Zdroj: en.wikipedia.org