Chromatogram pro to, co to je a jaké typy

chromatogramu je dvourozměrný grafický záznam získaný v absorpčním médiu, který ukazuje separaci látek chromatografií. Na chromatogramu se vytvoří viditelný vzor, ​​píky nebo skvrny, které odrážejí fyzikální separaci složek směsi.

Dolní číslo je chromatogram se třemi vrcholy, A, B a C, ze tří složek vzorku oddělených chromatografií. Bylo pozorováno, že každý ze tří píků má v časové ose chromatogramu jinou výšku a polohu.

Osa souřadnic nebo Y zaznamenává informace o síle signálu (v tomto případě v milivoltech mV). Představuje registr, v závislosti na detektoru, určité fyzikální vlastnosti látky nebo oddělené složky směsi.

Výška píku je úměrná koncentraci oddělené složky vzorku v optimálním systému. Tak je například snadné si představit, že složka B je ve větším poměru než A a C.

Na ose x nebo na ose X je znázorněn retenční čas složek vzorku nebo směsi. Je to doba, která uplyne od injekce vzorku, dokud se nezastaví, přičemž se liší pro každou čistou látku.

Index

• 1 Co je to chromatogram??
  • 1.1 Identifikace látek
  • 1.2 Klasifikace čistoty látek
  • 1.3 Kvantifikace látek
• 2 Typy
  • 2.1 Chromatogramy na papíře nebo tenkém filmu
  • 2.2 Chromatogramy generované detektory
• 3 Odkazy

Co je to chromatogram??

Představuje konečný záznam celého chromatografického procesu. Z toho jsou získány parametry, které jsou analyticky zajímavé. To lze získat jako elektronický soubor, tištěný histogram nebo podporu procesu; například na papíře.

Osa Y je generována detektory signálu nebo intenzitou odezvy, jako jsou spektrofotometry. Optimální analýza času, charakteristik získaných píků nebo skvrn je nezbytná; velikost, umístění, barva, mimo jiné.

Analýzy chromatogramů obecně vyžadují použití kontrol nebo standardů, látek identity a známé koncentrace. Analýza těchto kontrol umožňuje porovnat se vzorky charakteristickými pro složky zkoumaného vzorku.

V chromatogramu můžete pozorovat a analyzovat, jak byla separace složek směsi provedena. Jeho optimální studie umožňuje identifikovat látku, prokázat její čistotu, kvantifikovat množství látek přítomných ve směsi, mimo jiné.

Získané informace mohou být kvalitativní povahy; například, když se identifikují látky a stanoví se jejich čistota. Kvantitativní informace se týkají stanovení počtu složek směsi a koncentrace separovaného analytu.

Identifikace látek

Analýzou výsledků chromatogramu lze identifikovat různé látky porovnáním retenčních časů se známými látkami. Lze pozorovat, jestliže zkoumané látky cestují ve stejné vzdálenosti, pokud mají stejnou dobu jako známé látky.

Například chromatogram umožňuje detekci a identifikaci v moči sportovců metabolity léčiv, jako jsou stimulanty a steroidy. Je důležitou podporou při studiu a zkoumání některých metabolitů produkovaných genetickými poruchami u novorozence.

Chromatogram mimo jiné umožňuje detekci halogenovaných uhlovodíků přítomných v pitné vodě. V laboratorní analýze kontroly kvality je nepostradatelná, protože umožňuje detekci a identifikaci kontaminantů přítomných v různých produktech.

Klasifikace čistoty látek

V chromatogramu můžete rozlišovat mezi čistými a nečistými látkami. Čistá látka by v chromatogramu produkovala jediný pík; zatímco nečistá látka by produkovala dva nebo více píků.

Tím, že se odpovídajícím způsobem upraví podmínky, za kterých se provádí chromatografie, lze zabránit tvorbě jediného píku dvěma látkami.

Kvantifikace látek

Analýzou plochy píku chromatogramu lze vypočítat koncentraci složek vzorku.

Proto je plocha píku úměrná množství látky přítomné ve vzorku. Tato kvantitativní data jsou získána ve vysoce citlivých systémech, jako jsou například systémy, které generují plynové nebo kapalinové chromatografie.

Typy

Jedna z klasifikací chromatogramů úzce souvisí s různými typy chromatografií, které generují odpovídající chromatogram.

V závislosti na podmínkách provedení detektorů, mimo jiné, se chromatogram bude lišit svým obsahem a kvalitou.

Chromatogramy na papíře nebo tenkém filmu

Chromatogram může být generován přímo na papíře nebo tenkém filmu, což přímo ukazuje distribuci nebo distribuci složek vzorku.

To je velmi užitečné pro separaci a studium barevných látek, které mají přírodní pigmenty, jako je chlorofyl. Může být podroben vývojovým procesům v případě, že látky nemají žádnou přirozenou barvu a jsou vhodné pro kvalitativní studie.

Chromatogramy generované detektory

Chromatogram lze také získat pomocí detektoru, který zaznamenává odezvu, výstup nebo konečný signál chromatografie. Jak již bylo zmíněno, tento detektor je zpravidla spektrofotometr, hmotnostní spektrometr, automatické sekvencery, elektrochemické materiály, mezi jinými..

Chromatogramy generované ve sloupcích, ať už plynů, nebo kapalin, stejně jako ty, které mají vysoké rozlišení v tenké vrstvě, používají detektory.

V závislosti na typu detektoru může být chromatogram klasifikován jako diferenciální nebo integrální, v závislosti na formě odezvy detektoru.

Diferenciální chromatogram

Diferenční detektor průběžně měří signál odezvy chromatogramu, zatímco integrální detektory kumulativně měří odpovídající signál.

Diferenční chromatogram je chromatogram získaný diferenciálním detektorem. Mezi těmito detektory lze uvést například spektrofotometry a detektory změn elektrické vodivosti.

Tento typ chromatogramu ukázal výsledek separace aniontů ze vzorku, detekovaného nepřímou fotometrií. Rovněž byly získány stejné výsledky pro studium iontů, například s konečnou detekcí konduktometrií.

Horní graf ukazuje příklad diferenciálního chromatogramu získaného automatickými DNA sekvenátory (deoxyribonukleová kyselina). Graf jasně ukazuje vrcholy čtyř barev, jednu barvu pro každou z dusíkatých bází DNA.

Prostřednictvím podpory počítačového programu je usnadněna interpretace sledu analyzovaných DNA bází a také komplexnějších analytů..

Komplexní chromatogram

Integrální chromatogram odpovídá tomu, který byl získán integrálním detektorem. Na tomto chromatogramu je prokázán výstup jedné studované složky. Žádný pík není získán jako v diferenciálu.

V integrálním chromatogramu se získá záznam s tvarem popsaným jako krok. Tato forma je částí chromatogramu, která odpovídá množství jediné látky, která opouští kolonu.

Odkazy

1. Bhanot, D. (2013). Jak číst do chromatografie? Zdroj: lab-training.com
2. Carey, F. A. (2006). Organic Chemistry Sixth Edition. Mc Graw Hill
3. Chromatografie dnes. (2014). Co je to Chromatogram? Citováno z: chromatograftoday.com
4. Mathias, J. (2018). Příručka pro začátečníky: Jak interpretovat chromatografickou chromatografii hmotnostní spektrometrie. Zdroj: innovatechlabs.com
5. Španělská společnost chromatografie a příbuzné techniky. (2014). Chromatogram. Získáno z: secyta.es
6. Wikipedia. (2019). Papírová chromatografie. Zdroj: wikipedia.org