Co je to jednoduché barvení? Top Funkce



jednoduché barvení je rychlý a jednoduchý postup barvení, při kterém se používá jediné barvivo, proto se nazývá jednoduché. Používá se hlavně k určení morfologie a organizace buněk přítomných ve vzorku.

Přirozeně, že buňky nemají barvu, takže je nutné je nějakým způsobem vidět, když jsou pozorovány v mikroskopu.

Je důležité zdůraznit, že barviva používaná v jednoduchém barvení musí být základní s kladným nábojem (kationtovým), aby se mohly spontánně vázat na buněčnou stěnu a cytoplazmu..

Tyto buněčné struktury jsou záporně nabité. Proto je barvivo, kladně nabité, přitahováno k buňkám a spontánně se k nim váže. Všechny buňky přítomné ve vzorku jsou tedy rychle zbarveny.

Barviva používaná v jednoduchém barvení

V mikrobiologické laboratoři lze použít několik základních barviv. Nejpoužívanější jsou:

- Methylenová modř.

- Křišťálově fialová.

- Malachitová zelená.

- Základní fuchsin.

Všechna tato barviva dobře fungují v bakteriích, protože mají kladně nabité (kationtové) barevné ionty (chromofory)..

Časy zbarvení většiny těchto barviv jsou poměrně krátké. Obvykle se pohybují v rozmezí od 30 sekund do 2 minut, v závislosti na afinitě barviva.

Je důležité mít na paměti, že před barvením vzorku jednoduchým barvením musí být vzorek prodloužen a upevněn na sklíčko (sklíčko); Prodloužený a fixovaný vzorek se nazývá stěr.

6 kroků k provedení jednoduchého barvení

Krok 1

Položte sklíčko na stojan na barvení a naneste požadované barvivo. Nechte odpovídající čas.

Obvykle trvá jednoduché barvení v závislosti na použitém barvení několik sekund nebo několik minut.

Pozorování

V tomto kroku je důležité nepřekročit doporučenou dobu pro použité barvivo, protože krystaly by se mohly vytvořit na listu, což by vedlo k tomu, co je známo jako "artefakty", které narušují morfologii buněk..

Krok 2

Opatrně omyjte skvrnu sklíčka destilovanou vodou z láhve, nebo také vodou z vodovodu, která teče pomalu, až se odtok stane průhledným. Obvykle to trvá 5 až 10 sekund.

Pozorování

Neaplikujte proud vody přímo na nátěr, aby nedošlo k poškození jeho síly.

Pokud nemáte destilovanou vodu, můžete použít vodu z vodovodu bez jakýchkoliv problémů, protože to neovlivní výsledek barvení.

Krok 3

Sklíčko vysušte savými papírovými ručníky v jednom směru a bez otírání. Ujistěte se, že spodní část sklíčka je čistá.

Krok 4

Sledujte znečištěný nátěr v mikroskopu. Začněte s nejvzdálenějšími cíli, abyste správně lokalizovali oblast, kterou chcete pozorovat podrobněji. Změnit cíl dostat blíže a blíže k vzorku.

Pozorování

Pro použití objektivu s nejvyšším zvětšením (obvykle 100x) by měl být použit imerzní olej, protože pomáhá světlu proniknout lépe a obraz je ostřejší. Není nutné používat krycí sklíčko.

Krok 5

Nakonec zlikvidujte všechny vzorky ve vhodné nádobě, která je řádně označena jako "biologicky nebezpečný"..

Odkazy

  1. (2001). Mikrobiologické aplikace: Laboratorní manuál v obecné mikrobiologii (8) th ed.). Společnosti McGraw-Hill.
  2. Harisha, S. (2006). Úvod do praktické biotechnologie (1)st). Firewall Media.
  3. Moyes, R. B., Reynolds, J., & Breakwell, D. P. (2009). Předběžné barvení bakterií: Jednoduché skvrny. Současné protokoly v mikrobiologii, (SUPPL 15), 1-5.
  4. Pommerville, J. (2013). Alcamoovy laboratorní základy mikrobiologie (10)th). Jones & Bartlett učení.
  5. Prescott, H. (2002). Laboratorní cvičení v mikrobiologii (5) th). Společnosti McGraw-Hill.
  6. Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Principy mikrobiologie (1)st). Tata McGraw-Hill vzdělání.